Activation tagging l Promoter trapping

¢Ã Activation Tagging


 À¯ÀüÀÚ°¡ °¡Áö°í ÀÖ´Â ±â´ÉÀ» ¹àÈ÷´Â ¹æ¹ýÀ¸·Î ±¤¹üÀ§ÇÏ°Ô »ç¿ëµÇ´Â µ¹¿¬º¯ÀÌ ÀÛ¼º¹ý Áß, È­ÇÐÀû¡¤¹°¸®ÀûÀÎ ¹æ¹ý°ú T-DNA¸¦ »ðÀÔ½ÃŰ´Â ¹æ¹ýÀº À¯ÀüÀÚÀÇ ÀϺΠȤÀº ÀüºÎ°¡ ÆÄ±«µÇ¸é¼­ À¯ÀüÀÚ°¡ °¡Áö°í ÀÖ´Â °íÀ¯ÀÇ ±â´ÉÀÌ »ç¶óÁö°Ô µÇ¹Ç·Î, À̸¦ ÀÌ¿ëÇÏ¿© ±× À¯ÀüÀÚÀÇ ±â´ÉÀ» À¯ÃßÇÒ ¼ö ÀÖ´Ù. ±×·¯³ª ÀÌ·¯ÇÑ ¹æ¹ý¿¡ ÀÇÇØ Çü¼ºµÈ µ¹¿¬º¯ÀÌ´Â ¿¬°ü¼ºÀ» ¶ì´Â ´Ù¸¥ À¯ÀüÀÚµéÀÇ Á¸Àç¿¡ ÀÇÇØ Ç¥ÇöÇüÀ¸·Î ³ªÅ¸³ªÁö ¾Ê°Å³ª, Áß¿äÇÑ À¯ÀüÀÚÀÏ °æ¿ì ½Ä¹°ÀÇ Ä¡»ç(lethality)¸¦ À¯¹ßÇÒ ¼öµµ ÀÖ´Â ´ÜÁ¡ÀÌ ÀÖ´Ù. ÀÌ¿Í ´Þ¸® activation taggingÀº T-DNA°¡ À¯ÀüÀÚÀÇ ¿°±â¼­¿­À» ÆÄ±«ÇÏÁö ¾Ê°í ±× À¯ÀüÀÚÀÇ ¹ßÇöÀ» ÀÎÀ§ÀûÀ¸·Î Ȱ¼ºÈ­(activation) ½ÃŰ¹Ç·Î À¯ÀüÀÚÀÇ ±â´É È®ÀÎÀ» À§ÇÑ ÈÄ¼Ó ¿¬±¸¸¦ °¡´ÉÇÏ°Ô ÇÏ´Â ÀåÁ¡ÀÌ ÀÖ´Ù.



ÀÛ¿ë ¿ø¸®
T-DNA¸¦ »ðÀÔ½Ãų ¼ö ÀÖ´Â ºÎÀ§(right border¿Í left border)¿Í Àü»ç¸¦ ÁõÆø½ÃŰ´Â À¯ÀüÀÚ ¼­¿­(transcriptional enhancer sequence)À» Á¶ÇÕÇÏ°í ¿©±â¿¡ À¯ÀüÀÚ¸¦ ºÐ¸®ÇÒ ¶§ »ç¿ëÇÏ´Â À¯ÀüÀÚ¸¦ ºÙÀÎ ¿î¹Ýü(vector)¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ´Ù. ½Ä¹°ÀÇ ÇüÁúÀüȯÀ¸·Î T-DNA°¡ ¿°»öü¿¡ »ðÀ﵃ ¶§ Àü»çÁõÆø À¯ÀüÀÚ ¼­¿­¿¡ ÀÇÇØ¼­ T-DNA¿¡ ÀÎÁ¢ÇÑ À¯ÀüÀÚ°¡ Ȱ¼ºÈ­µÇ¸é¼­ ¹ßÇöÀÌ Áõ°¡ÇÑ´Ù. ¹ßÇöÀÌ Áõ°¡µÇ¾î ³ªÅ¸³­ º¯ÀÌü·ÎºÎÅÍ ¿î¹ÝüÀÇ ²¿¸®Ç¥(tag)¸¦ ÀÌ¿ëÇÏ¿© À¯ÀüÀÚ¸¦ ºÐ¸®ÇÑ´Ù.

Experimental flow


Àû¿ë ºÐ¾ß (Organism base/Cell base)
- ¾Ö±âÀå´ë¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ activation tagging

 ½Ä¹°¿¡¼­ ¸ðµ¨ ½Ä¹°·Î »ç¿ëµÇ´Â ¾Ö±âÀå´ë(Arabidopsis thaliana)¿¡ activation taggingÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© ´ë·®ÀÇ º¯ÀÌü¸¦ È®º¸Çϰí, ±×°ÍÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© ȯ°æ ½ºÆ®·¹½º ÀÎÀÚ¿Í °ü·ÃµÈ º¯ÀÌü¸¦ ¼±¹ßÇϰí À¯ÀüÀÚ¸¦ ºÐ¸®ÇÑ´Ù.

Experimental flow


- ¼¼Æ÷¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ activation tagging

 ¼¼Æ÷ ¼öÁØ¿¡¼­ activation tagging ±â¼úÀ» Àû¿ëÇÏ¿© ½Ä¹°ÀÇ ÀÌÂ÷ ´ë»ç»ê¹° Áß À¯¿ë¹°ÁúÀÇ »ý»ê°ú °ü·ÃµÈ À¯ÀüÀÚ¸¦ ´ë·®À¸·Î ¹ß±¼ÇÏ°í ¼¼Æ÷ÁÖÈ­ ¿¬±¸¸¦ ¼öÇàÇÑ´Ù.